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            采用TSKgel G5000PWXL 分離重組SARS-CoV-2 S蛋白


            發布時間:

            2022-10-20 11:15

              *重組SARS-CoV-2 S蛋白(Recombinant SARS-CoV-2 S proteins)

              【基本信息】

              SARS-CoV-2屬于冠狀病毒科、β冠狀病毒屬,是一種球形、有包膜的單正鏈RNA病毒。主要編碼4種結構蛋白:刺突糖蛋白(spike glycoprotein,S蛋白)、包膜蛋白(envelope protein,E蛋白)、膜蛋白(membrane protein,M蛋白)、核衣殼蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白)。S蛋白是新型冠狀病毒最重要的表面蛋白,是中和病毒感染抗體的主要靶點,也是疫苗設計的核心免疫原成分。S蛋白由S1和S2亞基組成,其中白受體結合域(RBD)位于S1亞基。這里對昆蟲細胞中表達并純化得到的了重組SARS-CoV-2 S蛋白及片段S1蛋白和RBD蛋白進行了高效尺寸排阻色譜(HPSEC)的分離和表征。

              【樣品制備】

              重組SARS-CoV-2 S 蛋白及片段S1蛋白、RBD蛋白參考方法[1]制備。

              【分析條件】

              色譜柱:TSKgel G5000PWXL(I.D.7.8 mm×30 cm,10 μm)

              流動相:10 mM PB(pH 7.4)

              流速:0.5 mL/min

              柱溫:室溫

              檢測器參數:UV @280 nm

              樣品:重組S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白

            綠百草科技

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              圖1純化后重組S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白分離色譜圖

              【結果與討論】

              采用高效凝膠色譜TSKgel G5000PWXL對純化后重組SARS-CoV-2 S 蛋白及片段RBD、S1溶液進行了分離。實驗結果表明:該色譜柱可有效實現純化后重組SARS-CoV-2 S蛋白、S1蛋白及RBD蛋白的分離。RBD、S1和S在洗脫體積分別為9.0 mL、5.5 mL和5.3 mL的HPSEC譜圖上均顯示一個主峰(見圖1)。

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